第二信使cAMP
cAMP(環(huán)腺甘酸) 由 ATP(三磷酸腺苷)衍生而來,其在生物體內發(fā)揮重要 作用:可在依賴于 cAMP 的信號傳導通路中發(fā)揮作用,并在多種生物進程中扮演 重要的第二信使的角色。例如:cAMP 可以介導傳遞胰高血糖素和腎上腺素的激 素效應;cAMP 也可結合并調節(jié)包括 HCN 等在內的離子通道。cAMP 的結構見圖 1。
在不同生物體內,cAMP 發(fā)揮著不同的生物學作用。真核細胞中,cAMP 及相 關激酶在糖原、糖,以及脂類代謝過程中通過激活蛋白激酶 A(PKA,或依賴 cAMP 的蛋白激酶)發(fā)揮作用;阿米巴蟲中,cAMP 作為細胞外的分泌信號,其周期波 動在細胞間傳播能使細胞趨同聚集;細菌中,cAMP 水平的高低隨著培養(yǎng)基中葡 萄糖濃度的含量升高而降低,原因是葡萄糖轉運到細胞中時會抑制 cAMP 產生酶 --腺苷酸環(huán)化酶的作用。
在病理方向,cAMP 在人腫瘤和前額皮質紊亂中有重要作用。鑒于 cAMP 是 激素發(fā)生生理反應的媒介物,深入研究該分子具有重要理論與現(xiàn)實意義。 Cloud-Clone Corp.針對該蛋白研制出了偶聯(lián)載體的 cAMP 分子、針對 cAMP 的特 異性抗體等試劑,供廣大研究者使用。
作為一種化學小分子,cAMP 分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才 能使其成為具有免疫原性的抗原。Cloud-Clone Corp.在 cAMP 分子上分別偶聯(lián)了 BSA、OVA、HSA,得到 BSA Conjugated cAMP(CPA003Ge11)、OVA Conjugated cAMP (CPA003Ge21)和 HSA Conjugated cAMP(CPA003Ge41)。并以偶聯(lián) OVA-cAMP 為抗原,免疫兔獲得抗血清后,通過純化和篩選得到抗 cAMP 特異性 的多抗(PAA003Ge01),同時該抗體還標記上生物素(biotin),獲得 biotin 標記的 抗 cAMP 多抗(以 OVA-cAMP 為抗原,得到 cAMP 多抗后與生物素偶聯(lián)得到 PAA003Ge71)。
該抗體 Western Blot 質量驗證結果如圖 2 所示,同時,我們還用人肝臟組織對 該抗體進行了 IHC 驗證(如圖 3),結果顯示在肝臟組織中有強陽性信號,且主要 集中于細胞膜上。以上實驗證明了抗 cAMP 抗體的高特異性。
在 cAMP 偶聯(lián)載體分子和及其抗體研制成功的基礎上,Cloud-Clone Corp.還 研發(fā)了 cAMP 檢測試劑盒,貨號為 CEA003Ge,由于 cAMP 是一個小分子,且在不 同物種中以同樣的形式存在,所以抗體和試劑盒可應用于不同物種的 cAMP 檢測。
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