ELISA 試劑盒（簡(jiǎn)稱(chēng)試劑盒）的穩(wěn)定性是指試劑盒在生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定界限內(nèi)保 持其特性的能力。根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的和條件不同，穩(wěn)定性試驗(yàn)可分為加速穩(wěn)定性試驗(yàn) 和長(zhǎng)期試驗(yàn)。

加速穩(wěn)定性試驗(yàn)，通常在 37 度下進(jìn)行，用于加快試劑盒中的生物試劑的化學(xué) 或物理變化速度考察試劑盒的穩(wěn)定性?？蓪?duì)試劑盒在運(yùn)輸、保存過(guò)程中可能會(huì)遇到 的短暫的超常條件下的穩(wěn)定性進(jìn)行模擬考察，并初步預(yù)測(cè)試劑盒在規(guī)定的儲(chǔ)存條件 下長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定性。

取有效期內(nèi)的試劑盒，在 37 度分別破壞 24 小時(shí)和 72 小時(shí)，檢測(cè)試劑盒的回 收率、線(xiàn)性和精密度，判斷試劑盒的有效性。

長(zhǎng)期試驗(yàn)，也稱(chēng)為效期穩(wěn)定性試驗(yàn)，是在規(guī)定的貯存條件下進(jìn)行，目的是考察 試劑盒在正常保存、使用過(guò)程中的穩(wěn)定性，能更直接地反映試劑盒的穩(wěn)定性特征， 是確定有效期和貯存條件的最終依據(jù)。取過(guò)效期 1 月內(nèi)的試劑盒，檢測(cè)試劑盒的陽(yáng) 性參考品符合率，回收率，線(xiàn)性和精密度，判斷試劑盒的有效性。

為了確保試劑盒的有效性，所有的試劑盒都通過(guò)了加速穩(wěn)定性試驗(yàn)和長(zhǎng)期穩(wěn)定 性試驗(yàn)。以 SEA056Ra（L141030739）為例，穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果如下。

一、加速穩(wěn)定性試驗(yàn)

1.回收率：分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的 IL10（加標(biāo)樣品），重復(fù) 測(cè)定并計(jì)算其均值，回收率為測(cè)定值與理論值的比率。（試劑盒的回收率在 70-130%之間）

表 1：正常保存條件，37 度破壞 24 小時(shí)和 37 度破壞 72 小時(shí)后試劑盒回收率檢測(cè)結(jié)果

2.線(xiàn)性：在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的 IL10，并倍比稀釋成 1:2，1:4，1:8， 1:16 的待測(cè)樣本，線(xiàn)性范圍即為稀釋后樣本中 IL10 含量的測(cè)定值與理論值的比 率。（線(xiàn)性范圍為 70-130%）

表 2：正常保存條件，37 度破壞 24 小時(shí)和 37 度破壞 72 小時(shí)后試劑盒線(xiàn)性檢測(cè)結(jié)果

3.精密度：用樣品測(cè)定值的變異系數(shù) CV 表示。CV(%) = SD/mean×100

批內(nèi)差（Intra-assay Precision）：取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行 定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定 20 次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及 SD 值。

批間差（Inter-assay Precision）：選取 3 個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高 值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定，每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定 8 次，分別計(jì)算不 同濃度樣本的平均值及 SD 值。(批內(nèi)差： CV<10%;批間差： CV<12%)

表 3：正常保存條件，37 度破壞 24 小時(shí)和 37 度破壞 72 小時(shí)后試劑盒精密度檢測(cè)結(jié)果

二、有效期穩(wěn)定性試驗(yàn)

1.回收率：分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的 IL10（加標(biāo)樣品），重復(fù) 測(cè)定并計(jì)算其均值，回收率為測(cè)定值與理論值的比率。（試劑盒的回收率在 70-130%之間）

表 4：正常保存條件下效期內(nèi)和過(guò)效期 1 月內(nèi)試劑盒回收率檢測(cè)結(jié)果

2.線(xiàn)性：在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的 IL10，并倍比稀釋成 1:2，1:4，1:8， 1:16 的待測(cè)樣本，線(xiàn)性范圍即為稀釋后樣本中 IL10 含量的測(cè)定值與理論值的比 率。（線(xiàn)性范圍為 70-130%）

表 5：正常保存條件下效期內(nèi)和過(guò)效期 1 月內(nèi)試劑盒線(xiàn)性檢測(cè)結(jié)果

3.精密度：用樣品測(cè)定值的變異系數(shù) CV 表示。CV(%) = SD/mean×100

批內(nèi)差：取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè) 定 20 次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及 SD 值。

批間差：選取 3 個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定， 每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定 8 次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及 SD 值。(批內(nèi)差： CV<10%;批間差： CV<12%)

表 6：正常保存條件下效期內(nèi)和過(guò)效期 1 月內(nèi)試劑盒精密度檢測(cè)結(jié)果