自Kohler和Milstein建立了淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)后，他們將只針對(duì)一種抗原決定簇產(chǎn)生抗體B淋巴細(xì)胞和能無限增殖的腫瘤細(xì)胞融合雜交，產(chǎn)生既能分泌抗體，又能無限增殖的雜交融合細(xì)胞，它所產(chǎn)生的抗體是針對(duì)同一抗原決定簇的高度同質(zhì)的抗體，即單克隆抗體（monoclonal antibody），簡(jiǎn)稱單抗。與多抗相比，單抗純度高，專一性強(qiáng)、重復(fù)性好、且能持續(xù)地?zé)o限量供應(yīng)。單抗技術(shù)的問世，不僅帶來了免疫學(xué)領(lǐng)域里的一次革命，而且它在生物醫(yī)學(xué)科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域獲得極廣泛的應(yīng)用，促進(jìn)了眾多學(xué)科的發(fā)展。

單克隆抗體制備的基本過程如下：

（1）用抗原免疫小鼠；

（2）從抗原免疫過的小鼠獲取脾細(xì)胞；

（3）應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞。這種細(xì)胞不僅能夠像B淋巴細(xì)胞一樣合成性質(zhì)穩(wěn)定的轉(zhuǎn)移性抗體，而且能夠像骨髓瘤細(xì)胞一樣無限復(fù)制，這樣就可以產(chǎn)生大量且性質(zhì)專一的鼠源抗體；

（4）對(duì)獲得的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選，選出能分泌高效價(jià)抗體的雜交瘤；

（5）對(duì)已篩選出的單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行鑒定和克隆。

雜交瘤產(chǎn)生的單克隆抗體在各個(gè)領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣，有很大的優(yōu)點(diǎn)和潛力。能夠根據(jù)需要進(jìn)行研發(fā)生產(chǎn)，可建立穩(wěn)定的細(xì)胞株持續(xù)供給應(yīng)用，相比于抗血清能夠減少大量的動(dòng)物和費(fèi)用，而且純度高，均一性好，可作為一種標(biāo)準(zhǔn)試劑。

在獲得能分泌高效價(jià)抗體的雜交瘤細(xì)胞株后，一般有兩種方法來獲得單克隆抗體：小鼠腹腔注射雜交瘤細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)。

（1）小鼠腹水：

將雜交瘤細(xì)胞接種到小鼠的腹腔，雜交瘤在腹腔內(nèi)增殖，取得腹水進(jìn)行純化即可得到抗體。此法易于操作，重復(fù)性高，且花費(fèi)少，得到的抗體量多，但傷害動(dòng)物，而且當(dāng)需要大規(guī)模制備抗體時(shí)需要大量動(dòng)物。

（2）細(xì)胞培養(yǎng)：

將雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)后的上清液中即含有抗體。這種方法適合大規(guī)模生產(chǎn)抗體。但是這種方法獲得的抗體雜質(zhì)相對(duì)較多，因?yàn)榧?xì)胞上清含有培養(yǎng)液，pH指示劑，細(xì)胞代謝廢物等。而且培養(yǎng)用的血清中的成分不明確，可能會(huì)含有能影響抗體純度的雜蛋白。所以在細(xì)胞培養(yǎng)中會(huì)逐漸將雜交瘤細(xì)胞通過逐步減少血清來馴化到無血清培養(yǎng)。

總之，單克隆抗體的高特異性，重復(fù)性使其在生物研究以及醫(yī)藥方向都有良好的應(yīng)用基礎(chǔ)以及前景。

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