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蛋白活性實驗-SCF活性蛋白

蛋白活性實驗-SCF活性蛋白


干細胞因子(SCF),也稱為肥大細胞生長因子(MGF)和鐵因子(SLF),在造血、精子和黑色素生成中起著重要作用。SCF已被證明可以刺激TF-1細胞的增殖。

 

實驗方法:測試這種效果,TF-1細胞被接種在96 孔板上,密度1 x 104細胞/孔,重復(fù)3孔。在不同濃度SCF37°C72 h,檢測不同濃度的SCF。倒置顯微鏡觀察細胞的生長,細胞計數(shù)以細胞計數(shù)(CCK-8)測定細胞增殖。簡要來說,每孔添加10μl CCK-8,于37°C孵育1 - 4小時,然后在450 nm測量吸光度。

 

實驗結(jié)果:用倒置顯微鏡觀察添加SCF孵育72h后,TF-1細胞的細胞增殖情況如圖1所示。

 

 

    A                                      B

Figure 1. Cell proliferation of TF-1 cells after stimulated with SCF .

(A) TF-1 cells cultured in RPMI-1640, stimulated with 10ng/ml SCF for 72h;

(B) Unstimulated TF-1 cells cultured in RPMI-1640 for 72h.

 

SCF的劑量效應(yīng)曲線如圖2所示。很明顯,它顯著促進了TF-1細胞的增殖,而ED50的效果通常是6.0713.69ng/ml。

                                   Figure 2. The dose-effect curve of SCF on TF-1 cells