云克隆推出了三大物種科研用血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性蛋白產(chǎn)品，以期為助力科研盡綿薄之力。

云克隆ACE2相關(guān)活性蛋白產(chǎn)品

以人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2，ACE2（APB886Hu01）活性蛋白為例，活性驗(yàn)證方案如下：

實(shí)驗(yàn)原理：

SARS-CoV和SARS-CoV-2的spike蛋白（SP）可通過結(jié)合宿主細(xì)胞表面血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2（ACE2）進(jìn)入宿主細(xì)胞，本實(shí)驗(yàn)通過結(jié)合ELISA檢測重組人ACE2和重組Spike 蛋白（SP）的相互作用。

實(shí)驗(yàn)試劑：

APB886Hu01  Active Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)

APX273Ge02  Active Spike Protein (SP)

PAB886Hu01  Polyclonal Antibody to Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)

SAA544Rb19  HRP-Linked Caprine Anti-Rabbit IgG Polyclonal Antibody 

實(shí)驗(yàn)方法：

用含有0.01% BSA的PBS（pH 7.4）梯度稀釋ACE2。將100μL樣品移入SP蛋白預(yù)包被酶標(biāo)板中，37℃孵育2小時(shí)。棄去孔內(nèi)液體，用PBST洗滌。除去洗液，加入抗ACE2 pAb孵育1小時(shí)，棄去孔內(nèi)液體，用PBST洗板3次。用辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗孵育后，棄去孔內(nèi)液體，用PBST洗板3次。加入底物溶液后，在37℃下孵育15-25分鐘。最后，向孔中加入50μL終止液，立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度。ACE2和SP的結(jié)合活性如圖1所示，這種作用呈劑量依賴性。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

圖1. 人ACE2與SP的結(jié)合活性

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