細(xì)胞外囊泡（extracellular vesicle，EV）是由細(xì)胞釋放的各種具有膜結(jié)構(gòu)的囊泡統(tǒng)稱。由于其直徑和發(fā)生方式的不同，分為4個亞群：外泌體（exosomes，直徑30~150 nm）、微泡（microvesicles，直徑100~1000 nm）、凋亡小體（apoptotic body，直徑100~5000 nm）和癌小體（oncosomes，直徑1~10μm）。其中外泌體的研究最為成熟，而凋亡小體是細(xì)胞凋亡過程中產(chǎn)生的，主要指胞膜皺縮內(nèi)陷，分割包裹胞質(zhì)，內(nèi)含DNA物質(zhì)及細(xì)胞器，形成的泡狀小體。細(xì)胞凋亡是由基因控制的細(xì)胞自主的有序死亡，是多基因嚴(yán)格控制的過程。這些基因在種屬間非常保守，如Bcl-2家族、caspase家族、癌基因如C-myc、抑癌基因如p53等。能夠誘發(fā)細(xì)胞凋亡的因素很多，如射線、藥物等。

雖然外泌體和凋亡小體囊泡直徑及產(chǎn)生方式不同，但它們的研究應(yīng)用方向類似，主要應(yīng)用于組織修復(fù)、損傷修復(fù)、糖尿病、心梗、抗腫瘤等領(lǐng)域。近幾年，對凋亡小體的研究熱度在逐漸升溫。因?yàn)榕c活細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體相比，凋亡細(xì)胞能以更高的效率產(chǎn)生凋亡小體。并且通過標(biāo)準(zhǔn)化操作可以完全控制細(xì)胞凋亡過程，但是擴(kuò)大外泌體的產(chǎn)生就沒那么容易了。例如2021年4月16日，《Science Advances》（IF=14.136）上在線發(fā)表的題為“Apoptotic body–mediated intercellular delivery for enhanced drug penetration and whole tumor destruction”的文章，該研究首先提出并證明凋亡小體可以在細(xì)胞凋亡后將剩余的藥物攜帶到鄰近的腫瘤細(xì)胞中；2021年5月4日，《Advanced Science》（IF=16.806）發(fā)表了題為“Delivering Antisense Oligonucleotides across the Blood-Brain Barrier by Tumor Cell-Derived Small Apoptotic Bodies”的文章，該研究表明腦轉(zhuǎn)移性癌細(xì)胞分泌的納米級凋亡小體，可作為一種能夠突破血腦屏障的藥物遞送載體。

《Science Advances》上發(fā)表的研究是通過喜樹堿（CPT）、PR104A和二硫鍵組成了異二聚體前體藥物CPT-SS-PR104A，后自組裝制備了CSSP NPs（納米顆粒）。納米藥物進(jìn)入細(xì)胞后，高水平的胞質(zhì)谷胱甘肽（GSH）會觸發(fā)二硫鍵斷裂，從而迅速釋放CPT和PR104A。CPT誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，從而產(chǎn)生了包含有CPT和PR104A的凋亡小體。凋亡小體可以通過鄰近效應(yīng)被鄰近細(xì)胞吞噬，從而將藥物傳遞到內(nèi)部缺氧的腫瘤細(xì)胞中。PR104A可以被激活以在低氧細(xì)胞中發(fā)揮細(xì)胞毒性，從而進(jìn)一步滲透藥物（圖1）。該研究表明，凋亡小體介導(dǎo)的鄰近效應(yīng)可以促進(jìn)CSSP NPs實(shí)現(xiàn)腫瘤滲透，從而消除所有腫瘤細(xì)胞亞群。

圖1. 凋亡小體將藥物攜帶到鄰近的腫瘤細(xì)胞中的示意圖（圖片來源于《Science Advances》雜志）

《Advanced Science》中的文章顯示研究者選擇了有高腦轉(zhuǎn)移能力的細(xì)胞系B16F10（小鼠黑色素瘤細(xì)胞）來產(chǎn)生凋亡小體。為了提高反義寡核苷酸（ASO）轉(zhuǎn)染到癌細(xì)胞中的效率，將TNF-α ASO與陽離子魔芋葡甘聚糖（cKGM）結(jié)合形成cKGM/ASO復(fù)合物（CKA），這些細(xì)胞系能表達(dá)甘露糖受體（MR），使得ASO轉(zhuǎn)染效率與Lipofectamine 2000相同。紫外照射后H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。含有cKGM/ASO復(fù)合物的凋亡小體被命名為“CABs”。研究者分離了小凋亡小體（<1000 nm），小凋亡小體直徑在納米級，不易被吞噬細(xì)胞吞噬，藥物裝載效率高。 裝載ASO的小凋亡小體（sCABs）被腦血管內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)，突破了由CD44v6介導(dǎo)的血腦屏障，最終被大腦中的小膠質(zhì)細(xì)胞吸收（圖2）。在帕金森?。≒D）小鼠模型中，sCABs通過ASO的抗炎作用，極大地改善了小鼠帕金森病的癥狀。

圖2. sCABs產(chǎn)生及ASO傳送到腦的示意圖（圖片來源于《Advanced Science》雜志）

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